Определение рН раневого экссудата проводят, погружая в него лакмусовую бумажку (лакмусовая проба). Более точным методом определения рН является электро-рН-метрический способ. Данное исследование раневой среды необходимо для применения соответствующего для нейтрализации рН среды лекарственного средства.
Для установления более эффективного антибиотика проводят бактериологическое исследование по определению чувствительности микробных возбудителей, выделенных из раневой среды. Важным исследованием по осуществлению контроля за регенеративными процессами в ране является метод целлофанографии. Для этого стерильный лист целлофана накладывают на рану и очерчивают на нем ее контур, ширину эпителиального ободка, зоны некротизации и гранулирования и даже контуры отдельных гранул. Целлофанографию проводят в разные сроки заживления раны и, сопоставляя цел-лофанограммы, легко устанавливают эффективность лечения и интенсивность регенеративных процессов в динамике.
Исследование мазков-отпечатков и диагностическое значение цитологического исследования. Мазки-отпечатки, берут с предварительно подготовленной поверхности раны. Легко касаясь раневой поверхности стерильным ватно-марлевым тампоном, смоченным изотоническим раствором натрия хлорида, удаляют гнойный экссудат. Перед этим ни в коем случае нельзя протирать поверхность раны во избежание повреждения грануляций, что может сказаться на получении неверных результатов.
Отпечаток берут, легко прикоснувшись к подготовленной раневой поверхности обезжиренным предметным стеклом, не допуская скользящего движения, так как это приводит к деформированию клеточного состава. Следует иметь в виду, что с одного и того же участка раны необходимо получить 4-5 отпечатков. В первом отпечатке преобладают клетки раневого экссудата и тканевого детрита, в последующих — обычно клетки поврежденной ткани или грануляции. Если рана узкая, мазки-отпечатки берут с помощью корнцанга и небольшого ватно-марлевого шарика, который вводят в глубину раны, касаясь им раневой поверхности, а затем прикладывают к предметному стеклу. Мазки-отпечатки фиксируют на 35 мин в спирт-эфире или на 3-5 мин в метиловом спирту и окрашивают по Романовскому-Гимза 25-40 мин. Изготовленные мазки просматривают под микроскопом с большим увеличением.
Исследование мазков позволяет определить фагоцитарную реакцию, активность и патогенность микрофлоры раны, прогнозировать течение и исход раневого процесса. Затем следует вести наблюдение за эффективностью применяемого лечения. В первые 2-3 дня после ранения на раневой поверхности обнаруживаются клетки вазогенного происхождения: нейтрофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты. Однако преобладают нейтрофилы, находящиеся на различной стадии фагоцитоза и деструктивных изменений. Кроме того, имеется большое количество микробных тел. В последующем с регенерацией грануляционной ткани в раневых отпечатках обнаруживаются молодые округлой формы полибласты, выраженный фагоцитоз и фаголиз, дегенеративно измененные нейтрофилы и уменьшение количества микробных тел. По мере очищения ран от некротизированной ткани и образования выраженного демаркационного вала в мазках-отпечатках преобладают полибласты, сгруппированные по 10-15 клеток, среди которых имеется большое количество фагирующих макрофагов. Параллельно с этим заметно снижается количество деструктивно измененных форм нейтрофилов и микробных тел. Полное очищение раны от мертвых тканей с образованием нормальных грануляций сопровождается преобразованием полибластов, имеющих вытянутую форму, в фибробласты. С появлением ободка эпидермиса в отпечатках могут появляться эпителиальные клетки. Следует отметить, что такое изменение цитологической картины раневых отпечатков наблюдается при хорошо выраженной иммунобиологической реактивности организма. Однако при резком ее угнетении и тяжелом общем состоянии животного в мазках-отпечатках обычно обнаруживается множество поврежденных нейтрофилов с незавершенным их фаголизом или отсутствием его. В таких нейтрофилах фагированные микроорганизмы хорошо воспринимают окраску, и только в единичных случаях обнаруживаются вакуоли со слабой прокрашенностью микробов, что является признаком недостаточного фагоцитоза. Также могут наблюдаться отдельные дегенеративные полибласты и большое количество микроорганизмов в виде значительно выраженных колоний при отсутствии макрофагов. Это свидетельствует о вирулентной активности патогенных микробов, недостаточно выраженной фагоцитарной активности, развившейся интоксикации, что должно ориентировать врача на немедленное принятие соответствующих лечебных мер.
В противоположность этому, если при таком течении раневого процесса появляются нормальные и фагирующие полибласты, то это следует расценивать как благоприятный признак, обычно сопровождаемый улучшением общего состояния животного. Последующее появление в раневых отпечатках вытянутых форм полибластов и фибробластов свидетельствует о созревании грануляционной ткани и превращении ее в рубцовую ткань.